Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™

Frozen-EZ酵母轉(zhuǎn)化試劑盒

【溫馨提示】：

見我司懋康生物整理的酵母雙雜交檢測(cè)（Yeast two-hybrid assay）產(chǎn)品專題。

基本描述

Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™（酵母轉(zhuǎn)化試劑盒）是一款專門設(shè)計(jì)用于酵母轉(zhuǎn)化和文庫(kù)篩選的試劑盒，比目前商業(yè)或公開的文獻(xiàn)方法更快捷和更有效。本試劑盒制備的酵母細(xì)胞可立即用于轉(zhuǎn)化或凍存待用（≤ -70°C）。本試劑盒制備的細(xì)胞適用于環(huán)形和線性DNAs轉(zhuǎn)化，同時(shí)也能用于其他真菌包括C. albicans，S. pombe和P. pastoris的轉(zhuǎn)化。

產(chǎn)品亮點(diǎn)：

• 高轉(zhuǎn)化效率：每µg質(zhì)粒DNA（環(huán)形）可產(chǎn)生10⁵ - 10⁶個(gè)酵母轉(zhuǎn)化子；
• 制備好的感受態(tài)細(xì)胞可凍存后待用；
• 快速簡(jiǎn)單步驟于10min內(nèi)可制備酵母感受態(tài)細(xì)胞；
• 簡(jiǎn)單單一步驟，1h內(nèi)完成轉(zhuǎn)化；
• 適用菌株類型廣（S. cerevisiae, C. albicans, S. pombe, Pichia pastoris）；
• 簡(jiǎn)單方法用于多質(zhì)粒轉(zhuǎn)化；

產(chǎn)品組分：本試劑盒可做120個(gè)常規(guī)轉(zhuǎn)化或600個(gè)微量轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。試劑盒4℃一年有效。

操作流程【見下圖】：

A，感受態(tài)細(xì)胞制備

30℃，于10ml YPD肉湯培養(yǎng)酵母菌直至中數(shù)量級(jí)（~5 x 10⁶-2 x10⁷ cells/ml 或OD₆₀₀= 0.8-1.0）。以下步驟室溫進(jìn)行。

A1，500 x g離心細(xì)胞4min，吸掉上清液；

A2，加入10ml EZ1溶液清洗沉淀。重新離心沉淀細(xì)胞，吸掉上清液；

A3，加入1ml EZ2溶液重懸沉淀細(xì)胞。

此時(shí)獲得的感受態(tài)細(xì)胞即可直接用于轉(zhuǎn)化或凍存?zhèn)溆茫?/span>≤ -70°C）。注意需緩慢凍存細(xì)胞，不可使用液氮瞬間凍存細(xì)胞。

B，轉(zhuǎn)化

以下步驟適用于新鮮制備和凍存（室溫融化）的酵母感受態(tài)細(xì)胞。

B1，取50µl感受態(tài)細(xì)胞與0.2-1µg DNA（體積少于5µl）混合；加入500µl EZ3溶液，*混合；

B2，30°C孵育45min，孵育過(guò)程中用手指輕彈或低速渦旋（如果適用于轉(zhuǎn)化DNA）2-3次讓其混勻；

B3，從上面轉(zhuǎn)化混合液中取50-150µl到適當(dāng)平板上，沒(méi)有必要沉淀或清洗細(xì)胞。、

B4，30°C孵育平板2-4天使得轉(zhuǎn)化子生長(zhǎng)。

訂購(gòu)信息：Zymo Research原裝正品，現(xiàn)貨供應(yīng)。咨詢，，：。

T2001 Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit™ User Manual

引用文獻(xiàn)：

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作，主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本，以誠(chéng)為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達(dá)分析

Frozen-EZ Yeast Transformation II Kit 酵母轉(zhuǎn)化試劑盒 克隆與表達(dá)分析

達(dá)分析